مطالعات سینتیکی آنزیم اوره آز در حضور پراکسید هیدروژن، نانوذرات اکسید نیکل و اکسید آهن و عوامل دگرگون کننده شیمیایی

آنزیم اوره آز (ec:3.5.1.5) از نظر عملکردی جزه خانواده آمیدوهیدرولازها و فسفوتری استراز می باشد . این آنزیم هیدرولیز اوره به کربن دی اکسید و آمونیاک را کاتالیز می کند. به صورت اختصاصی تر می توان گفت که اوره آز کاتالیز اوره به آمونیا و کربامات را کاتالیز می کند سپس کربامات به طور خود به خودی تجزیه و ایجاد آمونیاک و کربن دی اکسید می نماید . اوره آز یک متالوآنزیم(حاوی نیکل) با وزن مولکولی بالا است . وزن مولکولی اوره آز 480 یا 545 کیلو دالتون می باشد. هر مولکول اوره آز داری 840 آمینواسید می باشد که 90 تای آنها سیستئین می باشند. ph اپتیمم اوره آز 2/7 و دمای اپتیمم آن 40 درجه سانتیگراد می باشد. اوره آز لوبیای جک دارای زیرواحدهای یکسانی است (هر کدام 90 کیلو دالتون ) که بعنوان تریمر یا هگزامر تجمع می یابند. جایگاه فعال آنزیم در زیرواحد α قرار دارد و شامل دو یون نیکل با فاصله اتمی a0 5/3 ~ می باشد. یونهای نیکل به وسیله یک لیزین کربامیله شده و یک یون هیدروکسید به هم وصل شده اند. یون (i) ni با اتم نیتروژن رزیدیوی هیستیدین و یک مولکول آب احاطه شده. یون (ii)ni از طریق دو رزیدیوی هیستیدین (از طریق یون نیتروژن )، یک آسپارتیک اسید (از طریق یون اکسیژن ) و دو مولکول آب احاطه شده است. مولکولهای اوره برای واکنش به جایگاه فعال متصل می شوند و جایگزین مولکولهای آب می شوند. رزیدیوهای آمینواسید در اتصال سوبسترا، تثبیت حالت گذر و تسریع واکنش شرکت می کنند، به علاوه این رزیدیوهای آمینواسیدی در ساخت لبه متحرک جایگاه فعال آنزیم که به عنوان درب برای سوبسترا عمل می کند، شرکت می کنند. رزیدیوهای سیستئین به فراوانی در لبه متحرک آنزیم وجود دارند، این زیدیوها در تعیین موقعیت رزیدیوهای کلیدی جایگاه فعال نقش دارند. در این مطالعه سینتیک آنزیم اوره آز در حضور پراکسید هیدروژن ، نانوذرات اکسید نیکل و اکسید آهن و دیگر مواد شیمیایی بررسی شد که به منظور انجام این آزمایش ها از دستگاه اسپکتروفتومتر uv-vis شیمادزو مدل 4000pharmacia- استفاده گردید. آنزیم اوره آز با غلظت 075/0 میلی گرم بر میلی لیتر درتامپون فسفات آماده گردید. نتایج این آزمایش ها نشان دادندکه : 1)پراکسید هیدروژن اثر مهاری بر روی سینتیک اوره آز دارد و این اثر مهاری به وسیله بوریک اسید و بتامرکاپتو اتانول کاهش می یابد. 2) نانوذرات اکسیدنیکل و اکسیدآهن به عنوان یک مهارکننده غیر رقابتی برای اوره آز عمل می کنند و این اثر مهاری توسط edta کاهش می یابد. 3)بوریک اسید و مرکوریک سولفات به ترتیب به عنوان مهارکننده رقابتی وغیر رقابتی عمل می کنند.